收集到的外植体在自然环境表面会携带大量的微生物，如不妥善处理，会污染培养基，导致培养失败。所以在适当的季节，适当的母株，以及适当的外植体材料的选择上都需要进行相应的杀菌处理。那么植物组织培养外植体如何进行灭菌处理：

　　1.麻豆精品一区二区三区中常用的消毒试剂

　　消毒剂使用浓度/%消除难易消毒时间/min灭菌效果次氯酸钠2易5-30很好次氯酸钙9-10易5-30很好漂白粉饱和溶液易5-30很好升汞0.1-1较难2-10最好酒精70-75易0.2-2好过氧化氢10-12最易5-15好溴水1-2易2-10很好硝酸银1较难5-30好抑菌剂2-5中30-60较好

　　2.消毒方法

　　①首先，用水冲洗，将收集到的植物材料除去不用的部分，将材料切成适当大小，即灭菌容器可放入为宜。放置水龙头下流水冲洗1-2小时(可加入吐温等表面活性剂以提高清洗效果)，冲洗时间取决于材料的清洁程度。容易漂浮或细小的物料，可用纱布袋装好冲洗。水洗对于严重污染物料尤其有用。

　　②材料消毒，在超净工作台上，先用酒精处理材料进行表面浸润(由于酒精的渗透能力很强，不同材料应注意控制浸润时间)。材料的灭菌处理然后使用所选杀菌剂。材料不同，灭菌剂的灭菌时间也不同。摸索式的调整是必要的。特定的运作程序是：

　　将水洗后的物料放入灭菌培养瓶，然后倒入所选消毒液，轻轻搅动培养瓶，使物料与消毒液充分接触，排出泡沫，使消毒彻底。过了时间，消毒液要倒入备好的容器中，要注意不能将物料倒出，倾净后立即倒入无菌水，轻搅涮。洗涤时间和次数根据洗涤材料和洗涤液的选择确定。

　　③无菌水冲洗法

　　用预先准备好的无菌清水涮洗物料，涮洗时间为每次2-5 min左右，同时根据所用消毒液的种类，涮洗约3-l0次(对于易去除的消毒液，洗3-5次即可，对于难以去除的消毒液，应洗8-10次)。无菌水洗是为了消除杀菌剂杀伤植物细胞的副作用。

　　3.植物组织培养外植体灭菌处理的注意事项：

　　1.灭菌时间：从倒人消毒液起，直至倒入无菌水。必须记录时间，以便比较消毒效果和随后调整试验条件。

　　2.有时需要在消毒液中加入吐温-80等表面活性剂，这些表面活性剂的主要作用是使消毒液更易展开，更易浸人于消毒材料的表面。但是加入后对材料的伤害也在增加，一定要注意用量和灭菌时间，一般情况下表面活性剂加入灭菌液的量不能超过0.6%。

　　3.酒精渗透性很强，幼嫩的材料容易在酒精中变绿，因此浸泡时间不可过长，防止酒精杀死植物的组织细胞。

　　4.氯化汞除外，可在短期内贮存。其它消毒剂应在使用前与之按比例混合。